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Entwicklung und Evaluierung eines In-vitro-Testsystems zur Überprüfung der Wirkung von Schwermetallionen und Gossypol auf Sertoli-Zellen der Ratte

Winterstein, Udo


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Universität Justus-Liebig-Universität Gießen
Institut: Medizinisches Zentrum für Dermatologie und Andrologie
Fachgebiet: Medizin
DDC-Sachgruppe: Medizin
Dokumentart: Dissertation
Sprache: Deutsch
Tag der mündlichen Prüfung: 20.12.2001
Erstellungsjahr: 2001
Publikationsdatum: 25.01.2002
Kurzfassung auf Deutsch: n den letzten Jahren ist es in den entwickelten Industrienationen zu einem Anstieg der Zahl infertiler Paare gekommen.Der Grund dafür ist
in etwa 40%der Fälle bei den Männern zu suchen.Eine Schädigung der Sertoli-Zelle durch Umweltschadstoffe könnte hierfür verantwortlich
sein.Ziel dieser Arbeit war die Entwicklung und Evaluierung eines Testmodells,das die Auswirkungen von Schwermetallsalzen und der
Substanz Gossypol auf die biochemischen Leistungen und die Vitalität von Sertoli-Zellen untersucht.


Die Versuche wurden an Sertoli-Zellmonokulturen von Ratten durchgeführt.Die Zellen wurden für 24 Stunden mit den Substanzen
(Metallionen 5-100 µM;Gossypol 3-15 µM). inkubiert.Danach wurde der Proteingehalt bestimmt und die Vitalität der Zellen mit dem
MTT-Assay untersucht.Die Laktatproduktion wurde als metabolischer,die Inhibinproduktion als endokriner Parameter bestimmt.


Gossypol diente als Positivkontrolle,da seine reproduktionstoxische Wirksamkeit in Hinblick auf die Sertoli-Zelle bekannt ist.Es führte in
hohen Konzentrationen zu einem Rückgang der Zellvitalität um maximal 70%.Bleiazetat konnte die Vitalität maximal um etwa 50%negativ
beeinflussen,während Hexachloroplatinsäure und Kobaltchlorid zu einer Steigerung der im MTT-Assay gemessenen Aktivität der
mitochondrialen Dehydrogenasen führten.Nickelazetat beeinflußte die Vitalität nicht.Bis auf Bleiazetat waren alle Stoffe in der Lage,die
Laktatproduktion der Zellen zu steigern.Gossypol hatte mit einer Steigerung auf das maximal 15fache den stärksten Einfluß.Der Anstieg
der Laktatproduktion durch die Metallsalze lag zwischen dem 1,5-und 2,5fachen der Kontrolle.Die Inhibinproduktion ging unter dem Einfluß
von Gossypol und Bleiazetat parallel zum beobachteten Vitalitätsabfall zurück.Bei Hexachloroplatinsäure und Kobaltchlorid zeigt sich nach
einer initialen Steigerung,bei höheren Konzentrationen wieder ein Rückgang der Inhibinproduktion.


Die beobachteten Effekte durch Gossypol sind wahrscheinlich auf die Hemmung der Atmungskette zurückzuführen.Die Wirkungsweise der
Metalle ist unklar. Festzuhalten bleibt,daß die Laktat-und Inhibinbestimmung in Zusammenhang mit den Vitalitätswerten eine valide
Aussage über die toxische Potenz einer Substanz in bezug auf die Sertoli-Zelle zuläßt und damit ein effizientes Testmodell zur Verfügung
steht.