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Klonierung und Charakterisierung eines Phagenlysins und sein Einsatz zur diagnostischen Erkennung von Bacillus anthracis

Boll, Kerstin


Originalveröffentlichung: (2013) Giessen : VVB Laufersweiler
Zum Volltext im pdf-Format: Dokument 1.pdf (5.261 KB)


Bitte beziehen Sie sich beim Zitieren dieses Dokumentes immer auf folgende
URN: urn:nbn:de:hebis:26-opus-95769
URL: http://geb.uni-giessen.de/geb/volltexte/2013/9576/


Universität Justus-Liebig-Universit├Ąt Gie├čen
Institut: Institut f├╝r Hygiene und Infektionskrankheiten der Tiere ; Universit├Ąt Hohenheim, Institut f├╝r Umwelt- und Tierhygiene sowie Tiermedizin mit Tierklinik
Fachgebiet: Veterin├Ąrmedizin
DDC-Sachgruppe: Landwirtschaft
Dokumentart: Dissertation
Zeitschrift, Serie: Edition scientifique
ISBN / ISSN: 978-3-8359-6025-1
Sprache: Deutsch
Tag der m├╝ndlichen Pr├╝fung: 19.03.2013
Erstellungsjahr: 2013
Publikationsdatum: 29.05.2013
Kurzfassung auf Deutsch: Das Ziel der vorliegenden Arbeit war die Entwicklung und Evaluierung eines neuen Testverfahrens zur diagnostischen Erkennung von B. anthracis. Der Test sollte auf der erregerspezifischen Lyse durch das Bakteriophagen-kodierte Enzym PlyG beruhen. Er sollte einerseits unter einfachen Bedingungen ohne aufw├Ąndigen Ger├Ąteeinsatz durchzuf├╝hren und andererseits leicht zu standardisieren und zu beurteilen sein. Ferner sollte gepr├╝ft werden, ob PlyG zur Pr├Ąparation von DNA aus vegetativen Zellen und Sporen von B. anthracis geeignet ist. Zur Evaluierung der Tests bzw. Methoden wurden 108 B. anthracis-Isolate und 200 Isolate anderer Bacillus spp. aus der Stammsammlung des Instituts f├╝r Umwelt- und Tierhygiene der Universit├Ąt Hohenheim verwendet.
Im Zuge der hier durchgef├╝hrten Arbeiten konnte ein neues Diagnostikum entwickelt werden, das sich gut in die Palette der vorhandenen Tests zur Identifizierung von B. anthracis-Isolaten einf├╝gt. Da der Test hochgradig spezifisch und sensitiv ist und sich mit wenig Aufwand durchf├╝hren l├Ąsst, kann dieser Test zu einer Verbesserung der Milzbrand-Schnelldiagnostik vor allem in weniger gut ausgestatteten Labors beitragen. Seine einfache und leicht zu standardisierende Durchf├╝hrung bieten in Kombination mit der Stabilit├Ąt des rPlyGs vor allem gegen├╝ber dem gamma-Phagentest anwendungstechnische Vorteile.
Kurzfassung auf Englisch: The aim of this work was the development and evaluation of a new test procedure for the diagnostic detection of B. anthracis. The assay should be based on the pathogen-specific lysis by the bacteriophage-encoded enzyme PlyG. On the one hand it should be carried out under simple conditions without complex devices and on the other hand be easy to standardize and to judge. It ought to be examined whether PlyG is suitable for preparations of DNA from vegetative cells and spores of B. anthracis. To evaluate the assays and methods 108 B. anthracis isolates and 200 isolates of other Bacillus spp. from the strain collection of the Institute for Environmental and Animal Hygiene, University of Hohenheim were used.
As part of this work it was possible to develop a new diagnostic assay which fits well to the existing tests for identification of B. anthracis-isolates. Because the assay is highly specific and sensitive and can be performed with little effort, this assay can help to improve the anthrax diagnostic, especially in ordinary equipped laboratories. The simple and easy to standardize implementation combined with the stability of the rPlyG offers advantages in application in contrast to the gamma-phage.
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